Proses Pembersihan Hilir Vaksin Cirit-birit Babi

Cirit-birit adalah salah satu daripada tiga penyakit utama yang telah menyebabkan kerugian ekonomi yang besar kepada industri babi di China. Terdapat banyak faktor yang menyebabkan cirit-birit pada babi, dan faktor virus adalah yang paling serius. Babi dari semua peringkat umur boleh dijangkiti, terutamanya anak babi menyusu, dan kadar kematian selepas jangkitan boleh mencapai lebih daripada 50%. Virus cirit-birit epidemik babi (PEDV) dan virus gastroenteritis yang boleh ditularkan babi (TGEV) tersebar luas di dunia, dan kedua-dua virus itu boleh dijangkiti secara tunggal atau gabungan. Pada masa ini, tiada ubat khusus untuk merawat PEDV dan TGEV, dan pencegahan dan kawalan cirit-birit babi adalah terutamanya vaksin komersial.

Vaksin tradisional cirit-birit wabak babi terutamanya termasuk vaksin seluruh virus yang tidak aktif dan vaksin hidup yang dilemahkan. Secara klinikal, vaksin tidak aktif PEDV dan TGEV tandem atau vaksin yang dilemahkan, dan vaksin penyingkiran tiga kali ganda PEDV, TGEV dan rotavirus babi (RV) atau vaksin dilemahkan biasanya digunakan, kebanyakannya vaksin bersamaan PEDV dan TGEV.

Pada masa ini, terdapat banyak vaksin terhadap cirit-birit wabak babi di China.

Proses pengeluaran vaksin yang tidak aktif dan dilemahkan adalah serupa, terutamanya termasuk lima langkah kultur patogen, penyahaktifan patogen atau dilemahkan, pengekstrakan dan penulenan patogen, penyediaan dan pembungkusan vaksin, dan kawalan kualiti vaksin. Artikel ini terutamanya memperkenalkan prosedur pembersihan patogen.

Penjelasan

Tujuan penjelasan adalah untuk memastikan penyingkiran serpihan sel dan agregat zarah besar lain. Dalam pengeluaran kultur sel pelbagai racun, di samping mengandungi sejumlah besar zarah virus, terdapat banyak serpihan tisu sel dan produk metabolik dan kekotoran lain, menjadikan racun dalam keadaan mendung atau separa mendung, langsung penggunaan operasi kepekatan racun ini tidak lama lagi akan membuat membran ultrafiltrasi disekat, dan tidak dapat melengkapkan kepekatan racun, dan mengakibatkan sekerap membran ultrafiltrasi. Oleh itu, sebelum racun itu tertumpu, ia mesti terlebih dahulu dijelaskan, yang biasanya dilakukan dengan sentrifugasi berkelajuan rendah dan penapisan membran. Perlu diingatkan bahawa apabila menggunakan teknologi pemisahan membran, kerana bahan membran sering dengan kumpulan elektronegativiti atau hidrofobik, adalah perlu untuk menyiasat sama ada bahan membran mempunyai penjerapan kepada zarah virus.

Langkah penjelasan yang cekap memerlukan gabungan kapasiti penyingkiran zarah pepejal yang tinggi dan hasil produk yang tinggi, penguatan mudah dan perlindungan unit operasi hiliran kemudiannya. Pada masa ini, penapis dalam digunakan untuk operasi penjelasan.

Walau bagaimanapun, apabila skala penanaman terlalu besar, sejumlah besar membran penapis dalam akan diperlukan, menyebabkan peningkatan yang ketara dalam kos bahan habis pakai. Pada masa yang sama, ketumpatan tinggi kultur sel akan mengurangkan beban membran penapis dalam, mengakibatkan peningkatan kos dan pencairan produk yang berlebihan.

Kaedah penapisan mikro terutamanya menggunakan peranti penapisan aliran tangen, dan komponen membran adalah casstte membran rata dan gentian berongga. Penapisan aliran tangensial (TFF) didorong oleh perbezaan tekanan transmembran. Bahan dan kekotoran yang lebih kecil daripada saiz liang membran melalui membran, manakala kekotoran seperti sel dengan zarah yang lebih besar terperangkap. Saiz liang membran yang digunakan untuk penapisan mikro ialah {{0}}.45/0.22μm. Mikrofiltrasi aliran tangen gentian berongga secara langsung boleh memproses cecair kandungan pepejal tinggi, seperti medium kultur sel berketumpatan tinggi, boleh menghapuskan langkah sentrifugasi dan pra-penapisan dengan langkah yang lebih sedikit dan operasi mudah, membran boleh digunakan berulang kali melalui pembersihan, mengurangkan pelaburan peralatan dan operasi. kos, selaras dengan keperluan pengeluaran automatik modular.

Kepekatan dan pemurnian

Selepas penjelasan awal, medium kultur virus masih mengandungi sejumlah besar kekotoran, termasuk zarah yang rosak, cangkang virus, sitotoksin, medium, serum dan serpihan sel, dll. Jika kekotoran ini disuntik ke dalam haiwan, ia bukan sahaja akan menjejaskan keberkesanan vaksin, tetapi juga menyebabkan tindak balas imun yang kuat daripada perumah, dan juga membawa kepada kematian haiwan yang divaksin. Oleh itu, penumpuan dan penulenan diperlukan untuk membuang kekotoran seperti heteroprotein dan serpihan sel, meningkatkan dan mendorong tindak balas imun yang berkesan, mengurangkan jumlah vaksin yang digunakan, dan mengurangkan tindak balas buruk.

Prinsip penulenan virus: untuk mengekalkan aktiviti biologi dan infektiviti virus sebagai premis, untuk membuang kekotoran virus dan mengekstrak ketulenan tinggi virus.

Pada masa ini, kaedah kepekatan dan penulenan utama yang digunakan dalam pengeluaran berskala besar ialah ultrafiltrasi.

Kaedah ultrafiltrasi, terutamanya menggunakan peranti ultraturasan aliran tangen, sistem penapisan gentian berongga dan peralatan penapisan lain, dalam keadaan biasa, penggunaan kaedah ultraturasan boleh membuat virus menumpukan lebih daripada 100 kali ganda, kadar penyingkiran heteroprotein sehingga 99%. Antaranya, teknologi penapisan membran gentian berongga mempunyai kelebihan daya ricih ringan dan rendah, palam mudah, operasi fleksibel, jangka hayat dan kos rendah, dan penguatan mudah, jadi disyorkan untuk memilih gentian berongga untuk kepekatan dan penulenan virus.

Apabila kaedah ultrafiltrasi digunakan untuk kepekatan dan penulenan, adalah sangat penting untuk memilih saiz liang membran yang sesuai, yang secara langsung menentukan kecekapan dan kualiti kepekatan. Di satu pihak, adalah perlu untuk memilih apertur membran untuk memerangkap molekul sasaran dengan berkesan untuk memastikan hasil, dan sebaliknya, kesan penyingkiran dan kelajuan pemprosesan heteroprotein harus dipertimbangkan sepenuhnya. Oleh itu, prinsip terbaik adalah memilih membran dengan saiz liang terbesar yang boleh memerangkap molekul sasaran, dan cuba memilih membran penapis dengan pengedaran saiz liang seragam.

Virus cirit-birit Epidemik Porcine (PEDV) dan virus gastroenteritis yang boleh ditularkan (TGEV) adalah kedua-dua coronavirus, yang merupakan sfera polimorfik, dengan pancang seperti spike terbalik, dengan diameter antara 60 hingga 190nm. Penyakit rotavirus ialah penyakit zoonotik di mana rotavirus (RV) mempunyai rupa seperti roda dan diameter kira-kira 70nm. Ketiga-tiga virus ini secara amnya boleh dipintas menggunakan 100-750membran ultraturasan apertur kd.

Guidling Technology ialah perusahaan teknologi tinggi negara yang memfokuskan pada biofarmaseutikal, kultur sel, penulenan dan kepekatan bioperubatan, diagnosis dan cecair industri. Kami telah berjaya membangunkan peranti penapis emparan, kaset ultraturasan & penapisan mikro, penapis virus, sistem TFF, penapis kedalaman, gentian berongga, dll. Yang memenuhi sepenuhnya senario aplikasi biofarmaseutikal, kultur sel, dan sebagainya. Membran dan penapis membran kami digunakan secara meluas dalam kepekatan, pengekstrakan dan pengasingan pra-penapisan, penapisan mikro, ultraturasan dan penapisan nano. Barisan produk kami yang banyak, daripada penapisan makmal sekali guna kecil kepada sistem penapisan pengeluaran, ujian kemandulan, penapaian, kultur sel dan banyak lagi, memenuhi keperluan ujian dan pengeluaran. Teknologi Guidling tidak sabar-sabar untuk bekerjasama dengan anda!