Faktor yang Mempengaruhi Kesan Pembuangan Virus
Faktor yang Mempengaruhi Kesan Pembuangan Virus
Penapisan penyingkiran virus boleh mengeluarkan virus dalam larutan dengan ketara, dan kesan penyingkirannya berkaitan dengan tempat penapisan penyingkiran virus berlaku, kepekatan protein cecair suapan, tekanan penapisan, masa penyimpanan dan pengawetan krio, dsb.
1. Di mana penapisan penyingkiran virus berlaku
Penapisan penyingkiran virus boleh berlaku di mana-mana dalam penulenan hiliran, tetapi ia biasanya berlaku selepas penyahaktifan virus pH rendah, langkah kromatografi pertengahan atau langkah kromatografi akhir. Secara keseluruhannya, sepanjang proses hiliran, keperluan penapisan sebenar sangat bergantung kepada di mana dalam proses itu langkah penapisan virus berada, kerana kepekatan protein, ketulenan dan volum proses boleh berbeza-beza.
2. Kepekatan protein cecair suapan
Kepekatan protein sampel akan mempengaruhi fluks penapisan penyingkiran virus melalui interaksi antara larutan suapan dan beg membran. Kepekatan protein yang lebih tinggi akan mengurangkan kadar proses penapisan penyingkiran virus. Ia juga berkaitan dengan sifat protein itu sendiri dan membran itu sendiri. Biasanya, kepekatan produk dikurangkan semasa pencairan berterusan produk untuk meningkatkan kapasiti dan kadar aliran membran penapis penyingkiran virus.
3. Tekanan penapisan
Proses penapisan penyingkiran virus secara amnya perlu memastikan penapisan berterusan. Kerana gangguan tekanan boleh menyebabkan penembusan virus. Prinsipnya ialah: kesan perolakan cecair suapan yang mengalir melalui penapis menyebabkan zarah virus terperangkap pada permukaan membran atau terperangkap dalam saiz liang yang lebih kecil kerana pengecualian saiz molekul. Apabila tekanan menurun, kadar aliran dan kesan perolakan berkurangan. Virus akan melarikan diri dan keluar dari liang kecil, dan meresap ke liang besar dengan kebarangkalian tinggi untuk menembusi.
4. Masa penyimpanan dan cryopreservation
Sesetengah protein membentuk agregat semasa proses penyimpanan, terutamanya semasa cryopreservation. Agregat ini boleh memberi kesan pada penapisan penyingkiran virus. Oleh itu, ia perlu dinilai sama ada terdapat tempoh penyimpanan yang lama dalam proses pengeluaran atau bilakah cryopreservation diperlukan.
