CM Weak Ion-Kromatografi Membran Pertukaran

Pengenalan Produk Kromatografi Membran Pertukaran Kation Kuat SP 

 

2. Kelebihan Produk

Pantas dan Cekap Kapasiti mengikat tinggi boleh dicapai pada kadar aliran sehingga 40 kali lebih cepat daripada kromatografi resin tradisional. Berbanding dengan kromatografi berasaskan resin-konvensional, masa proses menggunakan kromatografi membran boleh dikurangkan sebanyak 30–40 kali. Kadar aliran operasi biasa adalah sekitar 10 MV/min.

2.2 Kecekapan Ikatan Tinggi Kromatografi membran mempamerkan kapasiti pengikatan yang tinggi dan kadar aliran yang tinggi pada penurunan tekanan rendah, membolehkan biomolekul bercas ditangkap dalam satu laluan melalui modul.

2.3 Boleh Skala dan Fleksibel Rangkaian penuh produk kromatografi membran boleh memenuhi pelbagai keperluan penulenan biomolekul, meliputi aplikasi daripada pembangunan proses kepada pengeluaran berskala-besar. Reka bentuk kapsul membenarkan operasi-sekali guna atau boleh dibersihkan dan digunakan semula selepas prosedur pembersihan yang betul.

2.4 Peningkatan Produktiviti Reka bentuk padat meminimumkan jejak kemudahan. Dengan menghapuskan operasi seperti pembungkusan lajur, pembersihan, pengesahan pembersihan dan penyimpanan lajur, pemprosesan boleh bermula selepas penyamaan mudah dengan penimbal yang agak kurang. Memandangkan tidak ada keperluan untuk pembungkusan lajur, pembersihan atau penyimpanan, kos buruh boleh dikurangkan lebih daripada 50%.

 

 

3 Parameter Teknikal

3.1 Bahan Struktur

	Skala makmal	skala kecil	skala perintis	skala pengeluaran
isipadu membran	0.2ml	5ml	140ml	5L
Struktur Sokongan Membran	Polipropilena
perumahan membran	Polipropilena
Wahai cincin	silikon

3.2 Ciri-ciri Operasi

	Skala makmal	skala kecil	skala perintis	skala pengeluaran
isipadu membran	0.2ml	5ml	400ml	5L
Kadar aliran yang disyorkan	1-6ml/min	25-150ml/min	2-12L/min	25-150L/min
Suhu operasi maksimum	35 darjah
Tekanan operasi maksimum	3bar (25 darjah )
Perbezaan tekanan maksimum	3bar (25 darjah )
Keadaan penyimpanan	20% ethanolaqueousspenyelesaian

Perbandingan menunjukkan bahawa hayat perkhidmatan kromatografi membran SP adalah setanding dengan SP Sepharose 6FF.

Rajah 1. Perubahan Kapasiti Ikatan Kromatografi Membran SP Selepas Pelbagai Kegunaan Diuji dengan Lisozim

Di samping itu, kami menilai kromatografi membran untuk kecekapannya dalam mengeluarkan protein sel perumah dan asid nukleik. Hasilnya adalah seperti berikut:

	DNA				HCP
	Pemulihan IgG	Kandungan(pg/mg IgG)oleh RT PCR		Faktor Penyingkiran	Kandungan(ng/mg IgG)oleh Elisa		Faktor Penyingkiran
Lari	%	Sebelum Membran Q	Selepas Q Membrane	Log	Sebelum Membran Q	Selepas Q Membrane	Log
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

Jadual 1. Kadar Penyingkiran DNA dan Protein Sel Hos dalam CHO-Bahan IgG Terungkap Menggunakan Kromatografi Membran SP

Satu siri eksperimen menunjukkan bahawa kromatografi membran SP boleh membuang bahan cemar dengan berkesan sambil mengekalkan kadar pemulihan yang tinggi bagi sasaran IgG.

Apabila membandingkan kromatografi membran Gudiling SP dengan jenama yang diimport, data kapasiti mengikat adalah seperti berikut:

Mengikatcapacity (mg/mL)	Sartorius	PALL	membimbing
Lisozim	25	32	29
Trypsin	22	27	25

Jadual 2. Prestasi Kapasiti Mengikat Protein Berbeza dalam Produk Kami dan Jenama Bersaing

Penilaian keseluruhan menunjukkan bahawa kapasiti pengikatan kami adalah setanding dengan produk import.

Rajah 2. Ujian Kapasiti Ikatan Modul Kromatografi Membran SP Menggunakan Lisozim sebagai Piawai

Berbanding dengan kapasiti pengikatan dinamik dan produk import, telah disahkan bahawa kebanyakan protein sasaran boleh ditangkap apabila lisozim dielusi dalam 190 mM NaCl.

Melalui keadaan elusi yang berbeza, kami mendapati bahawa profil elusi kromatografi membran adalah serupa dengan gel agarose, tetapi ketulenan protein berbeza dengan ketara pada kepekatan garam yang berbeza. Dalam R&D dan pengeluaran sebenar, adalah perlu untuk menentukan secara kuantitatif keadaan elusi optimum untuk mendapatkan-protein sasaran ketulenan tinggi.

 

4 Kes Permohonan Biasa

Penyingkiran DNA, virus, dan protein sel perumah

Tangkapan plasmid, virus, protein, dan penulenan oligonukleotida

Penyingkiran pigmen daripada sup penapaian yis dan penangkapan protein-berkapasiti tinggi

 

5 Prosedur Penggunaan

5.1 Penyediaan dan Pemasangan Peralatan:

5.1.1:Pasang modul kromatografi membran pada sistem kromatografi ÄKTA mengikut prosedur yang serupa dengan lajur resin, memastikan arah aliran sejajar dengan anak panah modul dan orientasi masuk. Sambungkan modul menggunakan sama ada kunci Luer atau kelengkapan gaya pengapit-untuk penyepaduan selamat ke dalam sistem.

5.1.2 Tetapkan kadar aliran suapan kepada5–10 MV/mindan degas modul menggunakan penimbal keseimbangan, memastikan efluen bebas daripada gelembung udara. Setelah dinyahgas, sambungkan saluran keluar meresap ke sistem kromatografi.

5.2:Rawatan Pra{1}}Penggunaan:

5.2.1:

Tetapkan kadar aliran suapan kepada5–10 MV/mindan lakukan pra{0}}rawatan dengan0.5 M NaOH untuk lebih daripada 5 MV, memastikan membran mencapai keseimbangan penuh.

5.2.2: Pada kadar aliran yang sama, lakukan pra{1}}rawatan dengan1 M NaCl untuk lebih daripada 5 MVuntuk memastikan membran mencapai keseimbangan penuh.

5.3 Proses Kromatografi

5.3.1 Tetapkan kadar aliran suapan kepada 5–10 MV/min dan seimbangkan membran dengan penimbal keseimbangan lebih daripada 5 MV, sehingga membran mencapai keseimbangan penuh.

5.3.2 Selepas 0.22 μm pra-penapisan, muatkan sampel ke atas membran sehingga pemuatan sampel selesai atau kapasiti pengikatan kromatografi dicapai.

5.3.3 Basuh dengan penimbal keseimbangan lebih daripada 10 MV sehingga isyarat UV kembali ke garis dasar.

5.3.4 Gunakan elusi kecerunan atau elusi berperingkat mengikut reka bentuk proses, dan kumpulkan pecahan mengikut keperluan.

5.4 Pasca CIP-Rawatan Penggunaan – Peranti Kromatografi Membran CIP (Pembersihan di Tempat)

5.4.1 Tetapkan kadar aliran suapan kepada 5–10 MV/min dan lakukan pembersihan dengan 1 M NaOH untuk lebih daripada 10 MV, sehingga isyarat UV berkurangan ke bawah garis dasar.

5.4.2 Selepas beredar selama 30 minit, tukar kepada pencucian air sehingga pH mencapai 7–8, kemudian teruskan pembersihan dengan etanol 20% sehingga kekonduksian menjadi hampir malar.

5.5 Penyimpanan Kromatografi Membran

Selepas penggunaan dan penyiapan CIP, modul membran boleh dikeluarkan dan disimpan dengan merendam dalam etanol 20%, atau ia boleh disimpan dalam-baris pada suhu bilik dalam larutan yang mengandungi etanol 20%. Larutan etanol 20% perlu diperiksa dan diganti secara berkala.

 

6. Maklumat pesanan

Penapis Kapsul Kromatografi Membran Pertukaran Anion Kuat Q

	Skala makmal	skala kecil	skala perintis	skala pengeluaran
Model Produk	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
Isipadu Membran	0.2ml	5ml	400ml	5L

Cool tags: cm ion lemah-kromatografi membran pertukaran, China, pembekal, pengilang, kilang, borong, pukal, dalam stok, sampel percuma