Q Kromatografi Membran Anion Kuat

 

2. Kelebihan produk

2.1 Pantas dan cekap - mencapai kapasiti pengikatan tinggi pada kadar aliran sehingga 40 kali lebih pantas daripada resin tradisional. Berbanding dengan kromatografi katil-paket, masa proses menggunakan kromatografi membran dikurangkan sebanyak 30–40 kali. Kadar aliran operasi biasa ialah 10 MV/min.

2.2 Kecekapan pengikatan tinggi - kromatografi membran mempamerkan kapasiti pemuatan yang tinggi dan kadar aliran yang tinggi di bawah keadaan penurunan tekanan rendah, membolehkan biomolekul bercas ditangkap dalam satu laluan.

2.3 Berskala dan fleksibel - siri penuh produk kromatografi membran boleh memenuhi pelbagai keperluan penulenan biomakromolekul, meliputi semua peringkat daripada pembangunan proses hingga pengeluaran berskala-besar. Reka bentuk struktur jenis kapsul-menyokong kedua-dua-pengoperasian sekali guna dan penggunaan semula selepas pembersihan.

2.4 Meningkatkan produktiviti - Reka bentuk padat meminimumkan jejak kemudahan. Dengan menghapuskan pembungkusan lajur, pembersihan, pengesahan pembersihan dan operasi penyimpanan lajur, proses tersebut memerlukan kurang penimbal untuk penyamaan dan boleh dilakukan secara langsung tanpa penyediaan lajur. Kos buruh boleh dikurangkan sehingga 50%.

 

3. Parameter teknikal

3.1 Bahan struktur

	Skala makmal	skala kecil	skala perintis	skala pengeluaran
isipadu membran	0.2ml	5ml	140ml	5L
Struktur sokongan membran:	polipropilena (PP)
perumahan membran	polipropilena (PP)
Wahai cincin	silikon

 

3.2 Ciri-ciri operasi

	Skala makmal	skala kecil	skala perintis	skala pengeluaran
isipadu membran	0.2ml	5ml	400ml	5L
Kadar aliran yang disyorkan	1-6ml/min	25-150ml/min	2-12L/min	25-150L/min
Suhu operasi maksimum	35 darjah
Tekanan operasi maksimum	3bar (25 darjah )
Perbezaan tekanan maksimum	3bar (25 darjah )
Keadaan penyimpanan:	20% larutan akueus etanol

 

Hayat perkhidmatan kromatografi membran Q adalah setanding dengan kromatografi gel agarose.

 

 

Rajah 1. Perubahan dalam kapasiti pemuatan kromatografi membran selepas pelbagai kegunaan dipantau oleh BSA

Selain itu, kami menilai kecekapan penyingkiran kromatografi membran untuk protein sel perumah dan asid nukleik. Hasilnya adalah seperti berikut.

	DNA				HCP
	Pemulihan IgG	Kandungan(pg/mg IgG)oleh RT PCR		Faktor Penyingkiran	Kandungan(ng/mg IgG)oleh Elisa		Faktor Penyingkiran
Lari	%	Sebelum Membran Q	Selepas Q Membrane	Log	Sebelum Membran Q	Selepas Q Membrane	Log
1	96.7	423	1.2	2.55	7	4.8	0.16
2	97.4	438	1.3	2.53	7	4.9	0.15
3	94.7	513	1.3	2.60	6	1.9	0.50
4	95	32	0.9	1.55	6	4.2	0.15
5	96.3	45	1.1	1.61	8	5.2	0.19
6	96.5	158	0.7	2.35	8	6.2	0.11
7	96.4	267	1.9	2.15	9	7.2	0.10
8	96.8	298	2.3	2.11	9	8.2	0.04
9	97.1	746	1.5	2.70	4	2	0.30
10	96.6	39	1	1.59	4	1.5	0.43

Jadual 1. Kadar penyingkiran DNA dan protein sel perumah dalam CHO-bahan IgG yang dinyatakan menggunakan kromatografi membran Q

 

Satu siri eksperimen menunjukkan bahawa kromatografi membran Q boleh membuang kekotoran dengan berkesan sambil mengekalkan pemulihan IgG sasaran tinggi.

Di samping itu, kami membandingkan kromatografi membran Gudiling dengan jenama yang diimport, dan data kapasiti pemuatan adalah seperti berikut:

Kapasiti pemuatan (mg/ml)	Sartorius	PALL	membimbing
BSA	29	60	45
SOD	25	40	35
Protein A	27	45	40
Trypsin	30	56	44

Jadual 2. Memuatkan prestasi protein yang berbeza pada produk kami dan produk pesaing

Penilaian keseluruhan menunjukkan bahawa kapasiti pemuatan kami adalah setanding dengan produk import,

Rajah 2.Menggunakan modul kromatografi membran Q, BSA digunakan sebagai protein standard untuk menilai kapasiti pengikatan. Kapasiti pengikatan dinamik dibandingkan dengan produk import. Keputusan menunjukkan bahawa kebanyakan protein sasaran boleh ditangkap dan dielusikan150 mM NaClapabila menggunakan BSA sebagai protein model.

Melalui keadaan elusi yang berbeza, kami mendapati bahawa kelakuan elusi kromatografi membran adalah serupa dengan kromatografi gel agarose. Ketulenan protein yang dicairkan pada kepekatan garam berbeza berbeza dengan ketara. Dalam pembangunan dan pengeluaran proses sebenar, adalah perlu untuk menentukan secara kuantitatif keadaan elusi optimum untuk mendapatkan protein sasaran dengan ketulenan tinggi.

 

4．Kes Permohonan Biasa

Penyingkiran DNA, virus, protein sel perumah (HCP), dan endotoksin

Tangkapan plasmid, virus, dan protein, serta penulenan oligonukleotida

 

5. Prosedur Operasi

5.1: Penyediaan dan Pemasangan Peralatan:

5.1.1:Sistem kromatografi AKTA: Pasang modul kromatografi membran dengan cara yang serupa dengan lajur yang dibungkus. Pastikan arah anak panah pada modul adalah konsisten dengan arah aliran suapan. Sambungkan sistem menggunakan penyambung Luer atau Tri-pelengkapan Pengapit.

5.1.2 Tetapkan kadar aliran masuk kepada 5–10 MV/min dan gunakan penimbal keseimbangan untuk mengeluarkan udara daripada sistem. Selepas memastikan tiada gelembung udara dalam aliran keluar, sambungkan saluran keluar meresap ke sistem kromatografi.

5.2:Rawatan Pra{1}}:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV untuk memastikan membran mencapai keseimbangan.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV untuk memastikan membran mencapai keseimbangan.

5.3 Proses Kromatografi

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV sehingga membran mencapai keseimbangan.

5.3.2 Selepas sampel dipra-ditapis melalui penapis 0.22 μm, muatkan ia pada lajur sehingga keseluruhan sampel digunakan atau kapasiti pengikatan kromatografi dicapai.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV sehingga isyarat UV jatuh ke garis dasar.

5.3.4 Lakukan elusi kecerunan atau linear mengikut protokol yang direka bentuk, dan kumpulkan pecahan mengikut keperluan.

5.4 Rawatan Selepas-CIP – Peranti Kromatografi Membran CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV sehingga isyarat UV jatuh di bawah garis dasar.

5.4.2 Selepas beredar selama 30 minit, tukar kepada cucian air sehingga pH mencapai 7–8, kemudian tukar kepada etanol 20% dan teruskan basuh sehingga kekonduksian stabil.

5.5, Penyimpanan Kromatografi Membran:

Selepas penggunaan dan penyiapan CIP, modul membran boleh dibongkar dan disimpan dalam etanol 20%, atau disimpan dalam talian pada suhu bilik dalam etanol 20%. Larutan etanol hendaklah diganti dan diperiksa secara berkala.

 

6. Maklumat Pesanan

Q Anion Kuat-Penapis Kapsul Kromatografi Membran Pertukaran

	Skala makmal	skala kecil	skala perintis	skala pengeluaran
Model Produk	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
isipadu membran	0.2ml	5ml	400ml	5L

Cool tags: q kromatografi membran anion kuat, China, pembekal, pengilang, kilang, borong, pukal, dalam stok, sampel percuma